سیستم تصویربرداری فلورسنت GFP/Chl.

FluorCamسیستم های تصویربرداری فلورسنت GFP/Chl بسته می توانند برای طیف وسیعی از مطالعات مولکولی و سلولی بیولوژی که به پروتئین فلورسنت سبز اعمال می شود، خدمات ارائه دهند. چرخ فیلتر کاملا توسط نرم افزار کنترل شده و برقی در سیستم تصویربرداری فلورسنت بسته نصب شده است و مجموعه ای از فیلتر ها برای تشخیص و تصویربرداری GFP، EGFP، wtGFP، YFP، BFP یا سایر پروتئین های فلورسنت باند و فلورسنت نصب شده اند.

سیستم تصویربرداری فلورسنت GFP/Chl. بسته FluorCam همچنین می تواند برای تشخیص تغییرات پویا و توزیع فضایی فلورسنت کلوروفلیس گیاهی، اندازه گیری فرآیند اثر کاوتسکی، خاموش کردن فلورسنت و سایر فرآیندهای فلورسنت فوری (موقت) و ارائه تصاویر فلورسنت دو بعدی استفاده شود. پیکربندی سخت افزاری که به طور خاص طراحی شده است، این سیستم را قادر می سازد به طور خودکار به پروتئین فلوروسنت، تصویربرداری فلوروسنت یا تصویربرداری فلوروسنت کلروفلیس تبدیل شود. این سیستم بسیار یکپارچه است و می تواند تطبیق تاریک نمونه را انجام دهد.

زمینه کاربردی:

• تشخیص فلوروسنت پروتئین ها و فلوروسنت ها

• انتقال ژن و فناوری بیوسنسور

• تحقیقات گیاهان ژنتیکی

• بررسی مقاومت در برابر ژنوتیپ های مختلف

• مطالعات تعامل گیاهان و میکروب

• مطالعات تعامل گیاهان و حیوانات بومی

· ویژگی های فوتوسنتیز گیاهان و غربالگری اختلالات متابولیکی

• تشخیص اجبار بیولوژیکی و غیر بیولوژیکی

مطالعات مقاومت گیاهان یا حساسیت

• تحقیق نابرابری حفره هوایی

• تحقیقات مربوط به آشفتگی متابولیک

• ارزیابی قدرت و تولید

ویژگی ها:

· عملیات آسان، اندازه گیری نمونه قابل تنظیم ارتفاع، ادغام جعبه انطباق تاریک اختصاصی، آسان برای درمان و عملیات انطباق تاریک گیاهان مورد اندازه گیری و غیره

CCD با وضوح بالا تا 1392 × 1040 پیکسل، برای ضبط سریع و دقیق فلوروسنت کلروفلیس و GFP

· اندازه گیری تصویربرداری تکراری خودکار، می تواند یک برنامه آزمایشی (پروتکل) اندازه گیری تصویربرداری چرخه خودکار تنظیم شود، داده های اندازه گیری تصویربرداری به طور خودکار با تاریخ زمان به کامپیوتر ذخیره می شود (با مهر زمان)

با انواع روش های آزمایشی عمومی (پروتکل ها) مانند اثر تحریک کاوتسکی، تجزیه و تحلیل خاموش کننده فلورسنت، اندازه گیری پارامترهای تجزیه و تحلیل بیش از 50

ماژول تصویربرداری رنگی TetraCam با حداکثر مساحت تصویربرداری 20 × 25 سانتی متر برای اندازه گیری برگ ها یا گیاهان

نمونه های معمولی:

• برگ، ساقه، دانه، ریشه، گیاه کوچک

• بافت های آسیب دیده، گیاه های کوچک در ظرف پتری

• میوه و گل

• باکتری های آبی، گیاهان سبز، باکتری ها

• حیوانات ژنتیکی تغییر یافته

پارامترهای فنی:

• پارامترهای اندازه گیری: Fo, Fo’, Fs, Fm, Fm’, Fp, FtDn, FtLn, Fv, Fv'/ Fm'，Fv/ Fm ,Fv',Ft,ΦPSII,NPQ_Dn, NPQ_Ln, Qp_Dn, Qp_Ln, qN, qP，QY, QY_Ln,Rfd, ETR بیش از 50 پارامتر فلورسنت کلورولیف، هر پارامتر می تواند تصویر رنگی فلورسنت دو بعدی را نشان دهد

پروتکل کامل اندازه گیری خودکار (protocol) برای ویرایش آزاد برنامه اندازه گیری خودکار

a) Fv / Fm: پارامترهای اندازه گیری شامل Fo، Fm، Fv، QY و غیره

b) اثرات تحریک کاوتسکی: پارامترهای فلوروسنت مانند Fo، Fp، Fv، Ft_Lss، QY، Rfd

c) تجزیه و تحلیل خاموش فلوراسنت: Fo، Fm، Fp، Fs، Fv، QY، ΦII، NPQ، Qp، Rfd، qL و غیره بیش از 50 پارامتر

د) منحنی پاسخ نوری LC: Fo، Fm، QY، QY_Ln، ETR و پارامترهای فلورسنت

ج) جذب PAR و NDVI (اختیاری)

f) دینامیک اکسیداسیون مجدد (اختیاری)

g) اندازه گیری تصویربرداری فلورسنت استاتیک مانند GFP

h) تجزیه و تحلیل دینامیک فلورسنت سریع OJIP (اختیاری): Mo (شیب اولیه منحنی OJIP) ، منطقه ثابت OJIP ، Sm (اندازه گیری انرژی مورد نیاز برای بستن تمام مراکز واکنش نوری) ، QY ، PI و غیره 26 پارامتر

سنسور CCD با وضوح بالا TOMI-2

اسکن خطی CCD

حداکثر وضوح تصویر: 1360 × 1024 پیکسل

• رزولوشن زمان: تا 20 فریم در ثانیه با حداکثر رزولوشن تصویر

رزولوشن تبدیل A/D: 16 بیتی (65,536 درجه رنگ خاکستری)

اندازه تصویر: 6.45μm × 6.45μm

f) حالت عملیاتی: 1) حالت ویدیویی پویا برای اندازه گیری پارامترهای فلورسنت کلورولیس؛ 2) حالت عکس برای اندازه گیری پروتئین های فلوروسنت و رنگ های فلوروسنت مانند GFP

g) حالت ارتباط: اترنت گیگابایت

• صفحه منبع نور: 4 صفحه بزرگ با قدرت بالا بسته بندی LED، هر صفحه منبع نور از 8 × 9 LED آرایه، صفحه منبع نور منطقه موثر با منطقه تصویربرداری همان 13 × 13 سانتی متر

• اندازه گیری نور: نور قرمز استاندارد 617nm، باند های دیگر اختیاری، مدت زمان 10μs-100μs قابل تنظیم

• نور دو رنگی: 2 نور قرمز (617 نانومتر) + 2 نور آبی (470 نانومتر) ، حداکثر قدرت نوری Actinic1 300 μmol (فوتون) / m².s، حداکثر قدرت نوری Actinic2 2000 μmol (فوتون) / m².s؛ حداکثر نور شیمیایی به 3000 μmol (فوتون) / m².s ارتقاء می یابد

• فلاش اشباع: حداکثر قدرت نوری 4000μmol (فوتون) / m².s، قابل ارتقاء به 6000 μmol (فوتون) / m².s

• مساحت تصویربرداری: 13 × 13 سانتی متر، برای تجزیه و تحلیل تصویربرداری برگ های گیاهی، بافت های گیاهی، جلبک ها، مس، پوشش زمین، گیاهان کامل یا چند گیاه، صفحه 96 سوراخ، صفحه 384 سوراخ و غیره

• ماژول اندازه گیری GFP: چرخ فیلتر 7 بیتی و فیلتر اختصاصی برای اندازه گیری GFP (پروتئین فلوروسنت سبز)

• ماژول اندازه گیری جذب PAR (اختیاری): نور قرمز دور 740nm (FAR) ، صفحه LED دو رنگی 660nm و فیلتر اختصاصی برای اندازه گیری جذب PAR و NDVI

• QA در تجزیه و تحلیل تصویربرداری دینامیک اکسیداتیک (اختیاری): اندازه گیری های فلوروسنت دینامیک STF با فلاش نوری تک چرخشی (STF) تا 120000 μmol (فوتون) / m².s در 100μs

• ماژول دینامیک فلوروسنت سریع OJIP (اختیاری): وضوح زمانی تا 1 µs، می تواند منحنی OJIP را با بیش از بیست پارامتر مرتبط از جمله اندازه گیری و تحلیل کند: Fo، Fj، Fi، P یا Fm، Vj، Vi، Mo، Area، Fix Area، Sm، Ss، N (تعداد چرخش کاهش QA) ، Phi-Po، Psi_o، Phi_Eo، Phi_Do، Phi_pav، ABS/RC (جریان کوانتومی جذب نور در مرکز واکنش واحد) ، TRo/RC (جریان کوانتومی جذب نور اولیه در مرکز واکنش واحد) ، ETo/RC (جریان کوانتومی انتقال اولیه الکترون در مرکز واکنش واحد) ، DIo/RC (پراکندگی انرژی مرکز واکنش واحد) ، ABS/CS (جریان کوانتومی جذب نور در قطعه نمونه واحد) ، TRo/CSo، RC/CSx (تراکم مرکز واکنش) ، PIABS (شاخص "عملکرد" یا شاخص بقا بر اساس جریان کوانتومی جذب نور) ، PIcs (شاخص "عملکرد" یا شاخص بقا بر اساس قطعه)

• صفحه نور LED ماوراء بنفش (اختیاری): 365nm یا 385nm، 1) اندازه گیری فلوروسنت چند رنگی (به سیستم تصویربرداری فلوروسنت چند طیف FluorCam مراجعه کنید)؛ 2) اندازه گیری wtGFP (پروتئین فلوروسنت سبز نوع وحشی) ، DAPI (4'، 6-دیگال-2-فینیل پین، یک رنگ فلوروسنت)

• صفحه نور LED آبی (اختیاری): 470 نانومتر، 1) اندازه گیری EGFP (پروتئین فلوروسنت سبز تقویت شده) 2) برای تحقیق عملکرد حفره هوا

• صفحه نور سبز LED (اختیاری): 530 نانومتر، اندازه گیری YFP (پروتئین فلوروسنت زرد)

* برای اندازه گیری پروتئین های فلوروسنت یا رنگ های فلوروسنت مانند wtGFP، DAPI، EGFP، YFP نیز نیاز به فیلتر مناسب دارد

• قابلیت های نرم افزار تحلیل تصویربرداری فلورسنت کلوروفلیس FluorCam: منوی عملکردی مانند Live (تست واقعی) ، Protocols (سفارشی کردن انتخاب برنامه آزمایشی) ، Pre-processing (پیش پردازش تصویربرداری) ، Result (نتایج تحلیل تصویربرداری)

• پروتکل های آزمایشی سفارشی مشتری: زمان تنظیم (مانند اندازه گیری مدت زمان نور، مدت زمان نور فتوشیمی، زمان اندازه گیری و غیره) ، شدت نور (مانند شدت نور فتوشیمی با کیفیت مختلف، شدت فلاش اشباع، اندازه گیری نور با مدولاسیون و غیره) ، با زبان برنامه های آزمایشی اختصاصی و اسکریپت ، کاربر همچنین می تواند از قالب برنامه های جادوگر در منوی پروتکل برای ایجاد برنامه های آزمایشی جدید استفاده کند.

• قابلیت تجزیه و تحلیل اندازه گیری خودکار: می توانید یک برنامه آزمایشی (پروتکل) را تنظیم کنید تا اندازه گیری چرخه تصویری بدون نظارت، تعداد تکرار و فاصله زمان سفارشی مشتری، داده های اندازه گیری تصویری به طور خودکار بر اساس تاریخ زمان به کامپیوتر ذخیره می شود (با مهر زمان)

  حالت عکس فوری: با استفاده از حالت تصویربرداری عکس فوری، می توانید قدرت نور، زمان شاتر و حساسیت را به طور آزاد تنظیم کنید تا تصاویر فلورسنت ثابت و فلورسنت فوری نمونه گیاه را به وضوح برجسته کنید.

• 

• پیش پردازش تصویربرداری: نرم افزار برنامه ریزی به طور خودکار چندین نمونه گیاه یا چندین منطقه را تشخیص می دهد و همچنین می تواند به صورت دستی منطقه مورد علاقه (ROI) را انتخاب کند. شکل انتخاب دستی می تواند مربع، دایره، چند ضلعی یا بخشی باشد. این نرم افزار به طور خودکار منحنی دینامیک فلورسنت و پارامترهای مربوطه را برای هر نمونه و منطقه انتخاب شده اندازه گیری و تحلیل می کند، تعداد نمونه یا منطقه نامحدود (> 1000)

• حالت تجزیه و تحلیل داده ها: دارای حالت "محاسبه دوباره متوسط سیگنال" (متوسط حسابی) و حالت "محاسبه دوباره متوسط سیگنال"، با استفاده از حالت "محاسبه دوباره متوسط سیگنال" در شرایط نسبت سیگنال و سر و صدا بالا، با انتخاب حالت "محاسبه دوباره متوسط سیگنال" در شرایط نسبت سیگنال و سر و صدا پایین برای فیلتر کردن خطاهای ناشی از سر و صدا

• نتایج خروجی: نمودار فلورسنت با وضوح زمان بالا، ویدیوی تغییر پویا فلورسنت، فایل اکسل پارامترهای فلورسنت، هیستوگرام، نمودار تصویربرداری پارامترهای مختلف، لیست پارامترهای فلورسنت با ROI مختلف و غیره

• پهنای باند آشکارساز CCD: 400-1000nm

· روشنایی: استاتیک یا پویا (سینوس)

پاسخ طیفی: بیشترین کارایی کوانتومی (70 درصد) در 540 نانومتر و 50 درصد کاهش در 400 نانومتر و 650 نانومتر

صدای خواندن: کمتر از 12eRMS، معمولا 10e

ظرفیت کامل تله: بیش از 70,000 e (unbinned)

BIOS: نرم افزار قابل ارتقاء

روش ارتباط: Gigabit Ethernet

ابعاد: 471 میلیمتر (W) × 473 میلیمتر (D) × 512 میلیمتر (H)

وزن: حدود 40 کیلوگرم

قدرت ورودی: Approx. 1100 W

ولتاژ برق: 90-240 ولت

کاربردهای معمولی:

موسسه علوم حیات شانگهای با استفاده از FluorCam برای اندازه گیری تصویربرداری GFP دریافت کرده است، که گیاهان با رنگ روشن، گیاهان که GFP را بیان می کنند، هر چه رنگ آنها قرمز باشد، نشان می دهد که GFP بیشتری بیان می شود.

انقباض حشرات مرجان دکمه ای - تجزیه و تحلیل تصویربرداری NDVI و GFP در فاز های مختلف (T1 = 0، T2 = 30، T3 = 60) (Miguel، 2014)

منشأ: اروپا