دامنه کاربرد سیستم جداسازی کروماتوگرافی مایع فشار پایین: تحقیق و آماده سازی در صنایع بیوشیمی، شیمی سنتز، محصولات طبیعی، توسعه دارو، شیمی مواد غذایی، شیمی کشاورزی، آرایشی، پلیمر و پتروشیمی. قابل اجرای لیئرالیز تبادل یون، لیئرالیز نزدیکی لیئرالیز فیلتر ژل، لیئرالیز هیدروفوبی و روش های دیگر، برای تجزیه و تحلیل جداسازی، آزمایش جریان پروتئین، آنزیم، اسید نوکلئوتید، پلی پپتید، (شامل / بدون اسید های آمینو آروماتیک) و هر گونه نمونه زیستی / غیر زیستی جذب ماوراء بنفش، انتخاب ایده آل برای تصفیه مولکول های زیستی است، دارای ویژگی های متعدد، استفاده ساده و اقتصادی است. طراحی کوچک برای به حداکثر صرفه جویی در فضای ذخیره سازی سرد و آزمایشگاه.

یادداشت

نیازهای مختلف شاخص های فنی تستر ماوراء بنفش دو پرتو با عملکرد بالا در پیکربندی سیستم برای آزمایش کمی در کارخانه های دارویی در سراسر کشور استفاده می شود. ویژگی های تجهیزات

اندازه گیری طول موج دوگانه پروتئین 280nm/254nm

مولکول های پروتئین حاوی اسید های آمینی آروماتیک مانند تیروزین و تراسین هستند. آنها دارای ویژگی جذب نور ماوراء بنفش هستند، اوج جذب آن در طول موج 280 نانومتر است، و مقدار تراکم نوری جذب در این طول موج متناسب با غلظت آن است، بنابراین می تواند به عنوان یک اساس برای کیفیت و اندازه گیری کمی پروتئین، به همین دلیل، جذب ماوراء بنفش در 280 نانومتر معمولا برای نظارت مداوم بر غلظت پروتئین در سیستم تجزیه و تحلیل استفاده می شود. با این حال، از آنجا که میزان تیروسین و تراسین در پروتئین های مختلف متفاوت است، برای تعیین دقیق مقدار، باید محصولات خالص پروتئین مورد اندازه گیری به عنوان استاندارد برای مقایسه یا در حال حاضر ضریب خاموشی آن را به عنوان مرجع شناخته شود. علاوه بر این، بسیاری از مواد غیر پروتئینی نیز در طول موج 280 نانومتر دارای ظرفیت جذب معین هستند که ممکن است اختلال ایجاد کنند. تاثیر آن به ویژه در اسید های نوکلئویی (پورین و پیریسین) شدیدتر است. جذب در 280 نانومتر 10 برابر قوی تر از پروتئین (در هر گرم) ، اما

اسید نوکلیکی در 254 نانومتر قوی تر جذب می شود و اوج جذب آن در نزدیکی 254 نانومتر است. ضریب کاهش نور اسید نوکلئویی در 254nm دو برابر 280nm است، در حالی که پروتئین برعکس جذب ماوراء بنفش 280nm بزرگتر از 254nm است.

معمولا

نسبت جذب نور پروتئین خالص: A280/A254 1.8

نسبت جذب نور اسید هسته ای خالص: A280/A254 0.5

بنابراین هنگامی که اسید نوکلیکی همزمان در محلول پروتئین وجود دارد (اکثر سیستم های زیستی این طور است)، باید OD254nm و OD280nm را همزمان اندازه گیری کنید. سپس بر اساس نسبت جذب دو طول موج، میزان واقعی پروتئین با استفاده از فرمول های تجربی برای حذف تاثیر اسید نوکلیکی اصلاح می شود.

غلظت پروتئین: 1.45×A280-0.74×A254 (mg/ml)

این فرمول تجربی با استفاده از مجموعه ای از داده های اندازه گیری شده توسط مخلوط پروتئین (مخمر انولازاز) و اسید نوکلیکی (مخمر نوکلیک اسید) با نسبت های مختلف غلظت شناخته شده ایجاد شده است.

پیکربندی سیستم